








生物人教版 (新課標(biāo))DNA重組技術(shù)的基本工具復(fù)習(xí)ppt課件
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這是一份生物人教版 (新課標(biāo))DNA重組技術(shù)的基本工具復(fù)習(xí)ppt課件,共26頁。PPT課件主要包含了DNA是遺傳物質(zhì),DNA連接酶,定向改造,基因工程的概念,重新組合,基因產(chǎn)物,核苷酸,黏性末端,堿基互補配對,受體細(xì)胞等內(nèi)容,歡迎下載使用。
1.了解基因工程的誕生歷程,說出基因工程的概念2.說出DNA重組技術(shù)所需的三種基因工具的作用
1.基因工程突破了生殖隔離,實現(xiàn) 了不同種生物間的基因重組。2.不同生物基因能拼接在一起的理 論基礎(chǔ)是DNA分子都是由4種脫氧核苷酸構(gòu)成的規(guī)則的雙螺旋結(jié)構(gòu)。3.外源DNA導(dǎo)入受體細(xì)胞表達(dá)的理論基礎(chǔ)是密碼子的通用性。4.限制性核酸內(nèi)切酶的作用特點是識別雙鏈DNA分子特定的核苷酸序列,并在特定位點上切割。5.限制酶和DNA連接酶的作用部位都是兩個脫氧核苷酸間的磷酸二酯鍵。
基因工程的概念及其誕生與發(fā)展
一、基因工程誕生的背景1.艾弗里證明了_________________;沃森和克里克闡明了_____________________;尼倫貝格等破譯了遺傳密碼,以上成就為基因工程的創(chuàng)立提供了重要的理論依據(jù)。
DNA分子的雙螺旋結(jié)構(gòu)
2.限制性核酸內(nèi)切酶和_____________等工具酶、質(zhì)粒等載體和逆轉(zhuǎn)錄酶的發(fā)現(xiàn),則直接促使了基因工程的誕生。
3.1973年,美國科學(xué)家科恩等將兩種不同來源的DNA分子進(jìn)行體外重組,并首次實現(xiàn)了在大腸桿菌中的表達(dá),創(chuàng)立了__________生物的新技術(shù)——基因工程。
1.對基因工程概念的理解
2.基因工程的原理和理論基礎(chǔ)(1)原理:基因重組。(2)理論基礎(chǔ):①拼接:不同生物DNA的基本組成單位相同,都是4種脫氧核苷酸;空間結(jié)構(gòu)相同,都是規(guī)則的雙螺旋結(jié)構(gòu)。②表達(dá):生物界共用一套遺傳密碼,相同的遺傳信息在不同生物體內(nèi)表達(dá)出相同的蛋白質(zhì)。
基因工程操作的基本工具
1.限制性內(nèi)切酶基因工程中常用的能夠準(zhǔn)確切割DNA的“手術(shù)刀”是限制性核酸內(nèi)切酶,它的特點是每一把“手術(shù)刀”只能識別特定的________序列,并在特定的位點上切割DNA分子,由其切割后的DNA分子有的形成__________,有的形成平口末端。
2.DNA連接酶由同一種限制性核酸內(nèi)切酶切割的兩種來源不同的DNA分子的“黏性末端”相互連接的過程,一是兩“黏性末端”上的核苷酸通過_____________相互結(jié)合在一起,二是DNA連接酶將DNA這把“梯子”的扶手?jǐn)嗫谶B接起來?!胺肿俞樉€”是對DNA連接酶的比喻。
3.載體將外源基因?qū)隷_________時所需要的運載工具叫做載體。常用的載體有質(zhì)粒、噬菌體以及一些可以起載體作用的______________。______是最早應(yīng)用的載體。
【思考感悟】?1.科學(xué)家利用噬菌體和動、植物病毒做載體的理由主要是什么?【提示】 噬菌體和絕大多數(shù)動、植物病毒僅由蛋白質(zhì)外殼和DNA分子組成,其中的DNA分子能與目的基因構(gòu)成重組DNA分子;重組的DNA分子可在宿主細(xì)胞內(nèi)進(jìn)行復(fù)制和表達(dá)。
1.DNA連接酶與DNA聚合酶的比較
2.限制性核酸內(nèi)切酶與DNA解旋酶的比較(1)相同點:都作用于DNA分子中的化學(xué)鍵。(2)不同點①作用部位不同:前者作用于磷酸與脫氧核糖之間的磷酸二酯鍵,而后者作用于兩個堿基之間的氫鍵。②作用結(jié)果不同:限制性核酸內(nèi)切酶在DNA分子特定部位切割DNA;DNA解旋酶是把雙鏈DNA分子間氫鍵打開使雙鏈DNA成為兩個互補的單鏈DNA分子。
【特別提醒】 限制性核酸內(nèi)切酶具有專一性,能識別特定的DNA序列,切出能互補配對的黏性末端或平口末端。
3.DNA連接酶與限制性核酸內(nèi)切酶的比較(1)區(qū)別
(2)兩者的關(guān)系可表示為:
【特別提醒】 由于核苷酸分子間的氫鍵是分子間作用力, 其斷裂與重新形成均與限制性核酸內(nèi)切酶、DNA連接酶無關(guān)。
4.質(zhì)粒載體的基本結(jié)構(gòu)最簡單的質(zhì)粒載體必須包括三個部分:(1)復(fù)制區(qū),含有復(fù)制原點。(2)遺傳標(biāo)記基因,主要是抗性基因,如抗生素抗性標(biāo)記基因或某些生化表型的標(biāo)記基因,可用于鑒定與篩選重組DNA分子。
(3)目的基因(外源基因)插入位點,即限制性核酸內(nèi)切酶的切割位點,便于外源DNA分子的插入。此外,質(zhì)粒載體一般還具有低分子量(小分子質(zhì)粒易于操作,也易于分離純化)等特征。
例一:下圖中所示黏性末端屬于由同一種限制酶切割而成的是( )①-T-C-G- | | | -A-G-C-T-T-A-A-②-C-A- | | - G-T-T-C-C-A-③-A-A-T-T-C- | - G-
④-A-G-C-T-T-C- | - A-G-A.①② B.①③C.①④ D.②③
解析:從圖中可以看出,①的一條鏈上游離堿基是-T-T-A-A-,另一條鏈上與之對應(yīng)的應(yīng)該是-A-A-T-T-,這樣③的堿基符合要求,如果將③與①配對起來,則可看出上下兩條鏈之間的切點都在G-A之間。再分析②與④,游離的堿基不能互補配對,其他組合也不能互補配對。答案:B
例二:作為基因的運輸工具——質(zhì)粒載體,必須具備的條件及理由是( )A.能夠在宿主細(xì)胞中穩(wěn)定地保存下來并大量復(fù)制,以便提供大量的目的基因B.具有多個限制性核酸內(nèi)切酶切點,以便于目的基因的表達(dá)C.具有某些標(biāo)記基因,以便為目的基因的表達(dá)提供條件D.能夠在宿主細(xì)胞中復(fù)制并穩(wěn)定保存,以便于進(jìn)行篩選
解析:質(zhì)粒具有能夠穩(wěn)定地在宿主細(xì)胞內(nèi)復(fù)制的特性,可以達(dá)到大量繁殖目的基因的目的,使基因工程的成功率更高。具有多個限制性核酸內(nèi)切酶切點,以便與外源基因連接;具有某些標(biāo)記基因,便于進(jìn)行篩選,如對抗菌素的抗性基因、產(chǎn)物具有顏色反應(yīng)的基因等。答案:A
例三:質(zhì)粒之所以能做基因工程的載體,是由于它( )A.含蛋白質(zhì),從而能完成生命活動B.能夠自我復(fù)制,而保持連續(xù)性C.是RNA,能夠指導(dǎo)蛋白質(zhì)的合成D.具有環(huán)狀結(jié)構(gòu),能夠攜帶目的基因
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