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高中生物課題2 月季的花藥培養(yǎng)復(fù)習(xí)練習(xí)題
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這是一份高中生物課題2 月季的花藥培養(yǎng)復(fù)習(xí)練習(xí)題,共9頁。試卷主要包含了選擇題,細菌密度的關(guān)系,非選擇題等內(nèi)容,歡迎下載使用。
(時間:60分鐘,滿分:100分)
一、選擇題(共25小題,每小題2分,共50分)
1.將配制好的培養(yǎng)基進行滅菌,應(yīng)用( )。
A.灼燒滅菌B.高壓蒸汽滅菌
C.干熱滅菌D.煮沸滅菌
解析:為保證各種成分的比例不受影響,配制好的培養(yǎng)基應(yīng)用高壓蒸汽滅菌。
答案:B
2.下面對發(fā)酵工程中滅菌的理解,不正確的是( )。
A.防止雜菌污染
B.消滅雜菌
C.培養(yǎng)基和發(fā)酵設(shè)備都必須滅菌
D.滅菌必須在接種前
解析:滅菌就是殺死各種微生物及其他生命形態(tài)(如芽孢),而不僅僅是消滅雜菌。
答案:B
3.下列有關(guān)微生物培養(yǎng)與應(yīng)用的說法,正確的是( )。
A.天然培養(yǎng)基是指直接取自自然界不需加工的培養(yǎng)基
B.接種前需對培養(yǎng)基、培養(yǎng)皿、接種環(huán)、實驗操作者的雙手等進行嚴格的滅菌處理
C.大腸桿菌的純化培養(yǎng)過程包括培養(yǎng)基的配制和純化大腸桿菌兩個階段
D.分離分解尿素的細菌時,尿素是培養(yǎng)基中唯一的氮源和碳源
解析:天然培養(yǎng)基是成分不明確的培養(yǎng)基,并不是不需加工配制的培養(yǎng)基;實驗者的雙手需進行消毒處理;分離分解尿素的細菌時,尿素是唯一氮源而不是唯一的碳源。
答案:C
4.下列關(guān)于微生物的培養(yǎng)和分離的敘述,不正確的是( )。
A.細菌能在液體培養(yǎng)基中以二分裂方式迅速擴增
B.噬菌體或大腸桿菌可在蛋白胨培養(yǎng)基中增殖
C.滅菌的目的是消滅與培養(yǎng)菌競爭的所有微生物
D.平板劃線法可分散細菌得到單菌落
解析:噬菌體營寄生生活,必須用活細胞培養(yǎng),而不能用無生命形態(tài)的培養(yǎng)基培養(yǎng)。
答案:B
5.檢驗培養(yǎng)基是否有雜菌污染的最有效的方法是( )。
A.將未接種的培養(yǎng)基放在實驗桌上培養(yǎng)
B.將未接種的培養(yǎng)基放在窗臺上培養(yǎng)
C.將未接種的培養(yǎng)基放在恒溫箱中培養(yǎng)
D.將已接種的培養(yǎng)基放在恒溫箱中培養(yǎng)
解析:檢驗培養(yǎng)基有沒有被雜菌污染,可選取未接種的培養(yǎng)基與接種樣品的培養(yǎng)基同時在恒溫箱中培養(yǎng)。如果在培養(yǎng)過程中未接種的培養(yǎng)基沒有菌落生長,說明培養(yǎng)基沒有被雜菌污染;若未接種的培養(yǎng)基有菌落生長,說明培養(yǎng)基被雜菌污染。
答案:C
6.微生物與人類生產(chǎn)、生活密切相關(guān),下列相關(guān)說法不合理的是( )。
A.土壤中的微生物能降解多種化合物,是大自然的清潔工
B.生活中許多發(fā)酵產(chǎn)品需要微生物,如釀醋需要的關(guān)鍵細菌是酵母菌
C.可利用能分解纖維素的微生物分解秸稈,并將其產(chǎn)物轉(zhuǎn)化為乙醇
D.許多微生物也可導(dǎo)致人類患病
解析:酵母菌是一種真菌。釀醋首先使用酵母菌發(fā)酵得到酒精,然后在有氧條件下用醋酸菌發(fā)酵得到食用醋。故選B。
答案:B
7.下列關(guān)于平菇(所需碳源為纖維素)培養(yǎng)的操作程序,正確的是( )。
A.配制牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基,接種,高壓蒸汽滅菌,培養(yǎng)
B.配制牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基,高壓蒸汽滅菌,接種,培養(yǎng)
C.配制棉子殼培養(yǎng)基,接種,高壓蒸汽滅菌,培養(yǎng)
D.配制棉子殼培養(yǎng)基,高壓蒸汽滅菌,接種,培養(yǎng)
解析:培養(yǎng)微生物的正確操作流程應(yīng)該為:配制培養(yǎng)基→滅菌→接種→培養(yǎng),平菇的碳源為纖維素,所以富含纖維素的棉子殼適宜作平菇的培養(yǎng)基。
答案:D
8.下列關(guān)于微生物培養(yǎng)和利用的敘述,不正確的是( )。
A.利用稀釋涂布平板法既能分離微生物也能對微生物進行計數(shù)
B.接種時連續(xù)劃線的目的是將聚集的菌種逐步稀釋獲得單個菌落
C.以尿素為唯一氮源且含酚紅的培養(yǎng)基可選擇和鑒別尿素分解菌
D.用大白菜腌制泡菜的過程中亞硝酸鹽含量變化是先減少后增加
解析:稀釋涂布平板法可以用于分離微生物以及對微生物進行計數(shù);接種時要連續(xù)劃線,這樣可以獲得單個菌落;大白菜腌制過程中開始時細菌大量繁殖,亞硝酸鹽含量增加,一般腌制10天后亞硝酸鹽含量下降。
答案:D
9.梯度稀釋過程中用移液管把菌液從一支試管轉(zhuǎn)移到下一支試管后,要用手指輕壓移液管的橡皮頭,吹吸三次,其目的是( )。
A.增加試管內(nèi)的溶氧量
B.使菌液與水充分混勻
C.使試管中菌液的濃度降低
D.使細菌的形態(tài)結(jié)構(gòu)發(fā)生改變
解析:用手指輕壓移液管上的橡皮頭,其目的是使菌液和水充分混勻,減小下次稀釋時的誤差。
答案:B
10.下列有關(guān)平板劃線操作的敘述,不正確的是( )。
A.將接種環(huán)放在火焰上灼燒,直到接種環(huán)燒紅
B.接種環(huán)在平板上劃線位置是隨機的
C.在挑取菌種前和接種完畢后均要將試管口通過火焰
D.最后將平板倒置,放入恒溫箱中培養(yǎng)
解析:A、C、D均屬于正確的無菌操作步驟。用接種環(huán)在培養(yǎng)基上劃線時應(yīng)把培養(yǎng)基劃分成5個首尾相連的區(qū)域,劃線位置不是隨機的。
答案:B
11.下列有關(guān)微生物培養(yǎng)的敘述,不正確的是( )。
A.測定土壤樣品中的細菌數(shù)目,常用稀釋涂布平板法進行菌落計數(shù)
B.在對微生物進行培養(yǎng)前,需要對微生物和培養(yǎng)基進行滅菌
C.酵母菌發(fā)酵過程產(chǎn)生的酒精,對其他微生物的生長有一定的抑制作用
D.分離能分解尿素的細菌,要以尿素作為培養(yǎng)基中唯一的氮源
解析:稀釋涂布平板法可以分離微生物也可以進行計數(shù);在對微生物進行培養(yǎng)前,需要對培養(yǎng)基進行滅菌,微生物不能滅菌;酵母菌發(fā)酵產(chǎn)生的酒精能抑制其他微生物的生長;利用特定培養(yǎng)基可以進行特定菌的分離,如用以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基分離能分解尿素的細菌。
答案:B
12.在做土壤中分解尿素的細菌的分離與計數(shù)實驗時,甲組實驗用只含尿素作氮源的培養(yǎng)基,乙組實驗用另加入硝酸鹽的培養(yǎng)基,其他成分都相同,在相同條件下操作、培養(yǎng)與觀察,則乙組實驗屬于( )。
A.空白對照B.標(biāo)準對照
C.相互對照D.條件對照
解析:甲、乙兩組的自變量為是否僅以尿素作為培養(yǎng)基的氮源,因變量為是否特異性地分離出分解尿素的細菌,甲組為實驗組,乙組雖然對培養(yǎng)基作了特殊的處理(另加入硝酸鹽),但這種處理起對照作用,叫條件對照。
答案:D
13.在農(nóng)田土壤的表層自生固氮菌較多。將用表層土制成的稀泥漿接種到特制的培養(yǎng)基上培養(yǎng),可將自生固氮菌與其他細菌分開,對培養(yǎng)基的要求是( )。
①加抗生素 ②不加抗生素 ③加氮素 ④不加氮素 ⑤加葡萄糖 ⑥不加葡萄糖
A.①③⑤B.②④⑥
C.②④⑤D.①④⑥
解析:自生固氮菌是以N2為氮源、以土壤基質(zhì)中的有機物為碳源和能源的細菌,所以要將其與其他細菌分開所用的特制培養(yǎng)基不需另加氮源。所有細菌對抗生素都敏感,所以為了使自生固氮菌正常生活,不得加入抗生素。
答案:C
14.以下關(guān)于倒平板的操作,錯誤的是( )。
A.在火焰旁取下裝有培養(yǎng)基的瓶塞
B.倒平板前,讓錐形瓶的瓶口迅速通過火焰
C.倒平板時將培養(yǎng)皿的蓋拿開,以方便將錐形瓶中的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿
D.平板冷卻凝固后要倒過來放置
解析:為避免雜菌污染培養(yǎng)基,倒平板時用左手將培養(yǎng)皿打開一條稍大于瓶口的縫,右手將錐形瓶中的培養(yǎng)基(約10~20 mL)迅速倒入培養(yǎng)皿,左手立即蓋上培養(yǎng)皿的皿蓋。
答案:C
15.三個培養(yǎng)皿中分別加入10 mL不同的培養(yǎng)基,然后接種相同的大腸桿菌樣液。培養(yǎng)36小時后,計算菌落數(shù),結(jié)果如下表。下列選項正確的是( )。
A.該實驗采用的是液體培養(yǎng)基
B.該實驗采用稀釋涂布平板法接種
C.Ⅰ和Ⅲ對照,說明大腸桿菌的生長不需要生長因子
D.Ⅰ和Ⅲ對照,說明大腸桿菌的生長需要糖類
解析:該實驗采用的培養(yǎng)基都加入了瓊脂作為凝固劑,是固體培養(yǎng)基;計數(shù)時應(yīng)采用稀釋涂布平板法接種微生物;Ⅰ和Ⅲ對照有兩個自變量,無法分析生長因子和糖類是否是大腸桿菌生長所需的物質(zhì)。
答案:B
16.以下關(guān)于菌種保藏的敘述,錯誤的是( )。
A.菌種保藏的目的是保持菌種的純凈
B.固體斜面培養(yǎng)基可用于菌種的臨時保藏
C.菌種的長期保存一般采用甘油管藏
D.由于甘油管藏菌種在-20 ℃條件下進行,因此對甘油可不必滅菌
解析:接種前培養(yǎng)基都需滅菌。
答案:D
17.要從多種細菌中分離某種細菌,培養(yǎng)基要用( )。
A.固體培養(yǎng)基
B.液體培養(yǎng)基
C.加入青霉素的培養(yǎng)基
D.加入高濃度食鹽的培養(yǎng)基
解析:固體培養(yǎng)基主要用于微生物分離、鑒定等。液體培養(yǎng)基用于工業(yè)生產(chǎn)。加入青霉素的選擇培養(yǎng)基能抑制細菌、放線菌的生長,從而分離酵母菌和霉菌。加入高濃度食鹽能抑制多種細菌的生長,可分離金黃色葡萄球菌。本題沒有說明分離哪種細菌,故應(yīng)用固體培養(yǎng)基,如在固體培養(yǎng)基上以劃線方法接種,然后再分離出菌落。
答案:A
18.分離土壤中分解尿素的細菌,對培養(yǎng)基的要求是( )。
①加尿素 ②不加尿素 ③加瓊脂 ④不加瓊脂 ⑤加葡萄糖 ⑥不加葡萄糖 ⑦加硝酸鹽 ⑧不加硝酸鹽
A.①③⑤⑦B.②④⑥⑧
C.①③⑤⑧D.①④⑥⑦
解析:土壤中分解尿素的細菌能夠合成脲酶,將尿素分解生成氨,利用尿素中的氮合成自身有機物;培養(yǎng)基中只加尿素作為唯一氮源,分解尿素的細菌能生長,其他微生物不能生長;分離微生物要用固體培養(yǎng)基;土壤中分解尿素的細菌屬于異養(yǎng)微生物,需要加葡萄糖作為碳源。
答案:C
19.下列對剛果紅染色法的敘述,不正確的是( )。
A.可以先培養(yǎng)微生物,再加入剛果紅進行顏色反應(yīng)
B.可以在倒平板時就加入剛果紅
C.既可以先培養(yǎng)微生物,再加入剛果紅進行顏色反應(yīng),也可以在倒平板時就加入剛果紅
D.可以將剛果紅與培養(yǎng)基中的其他物質(zhì)混合后再滅菌倒平板
解析:剛果紅染色法一般有兩種:一種是先培養(yǎng)微生物長出菌落后,再加入剛果紅進行顏色反應(yīng);另一種是配制好培養(yǎng)基滅菌后,倒平板時加入滅菌處理的剛果紅,再接種微生物培養(yǎng),直至產(chǎn)生透明圈。
答案:D
20.微生物培養(yǎng)過程中,要十分重視無菌操作,現(xiàn)代生物學(xué)實驗中的許多方面也要進行無菌操作,防止雜菌污染,請分析下列操作,錯誤的是( )。
①煮沸消毒可以殺死微生物的營養(yǎng)細胞和部分芽孢 ②接種操作要在酒精燈火焰附近進行 ③無菌繁殖脫毒苗時,植物的外植體要進行消毒 ④家庭制作葡萄酒時要將容器和葡萄進行滅菌 ⑤培養(yǎng)基要進行高壓蒸汽滅菌 ⑥加入培養(yǎng)基中的指示劑和染料不需要滅菌
A.①③B.②④
C.③⑤D.④⑥
解析:無菌操作包括消毒和滅菌。需進行消毒處理的有植物的外植體及操作人員的雙手等,需進行滅菌的有器皿、培養(yǎng)基、添加劑(指示劑或染色劑)等。煮沸可以殺死微生物的營養(yǎng)細胞和一部分芽孢,屬于消毒;為防止空氣中的雜菌污染,接種時要在酒精燈火焰附近進行;家庭制作葡萄酒時所利用的微生物是葡萄表面的酵母菌,故不能滅菌;培養(yǎng)基常進行高壓蒸汽滅菌。故④⑥操作錯誤。
答案:D
21.用平板劃線法或稀釋涂布平板法純化大腸桿菌時( )。
①可以用固體培養(yǎng)基 ②都需要使用接種針進行接種
③都需要在火焰旁進行接種 ④都可以用來計數(shù)活菌
A.①②B.③④
C.①③D.②④
解析:平板劃線法或稀釋涂布平板法都使用固體培養(yǎng)基,故①正確;平板劃線法采用接種環(huán)進行操作,而稀釋涂布平板法采用涂布器進行操作,故②錯誤;純化時,要進行無菌操作,需要在火焰旁接種,避免空氣中的微生物混入培養(yǎng)基,故③正確;平板劃線法一般用于分離而不是計數(shù),故④錯誤。
答案:C
22.在細菌的連續(xù)培養(yǎng)過程中,要以一定速度不斷添加新的培養(yǎng)基,同時以同樣速度放出老的培養(yǎng)基。右圖表示培養(yǎng)基的稀釋率(培養(yǎng)基的更新速率)與培養(yǎng)容器中營養(yǎng)物質(zhì)濃度、細菌代時(細菌數(shù)目增加一倍所需的時間)、細菌密度的關(guān)系。下列相關(guān)敘述不正確的是( )。
A.在稀釋率很低的情況下,稀釋率的增加會導(dǎo)致細菌密度增加
B.稀釋率從A到B的變化過程中,細菌生長速率不斷提高
C.稀釋率超過B點后,營養(yǎng)物質(zhì)濃度過高導(dǎo)致細菌死亡率增大,細菌密度降低
D.為持續(xù)高效地獲得發(fā)酵產(chǎn)品,應(yīng)將稀釋率控制在B點附近
解析:稀釋率超過B點,細菌密度降低,并不是由于營養(yǎng)物質(zhì)濃度過高而使細菌死亡,營養(yǎng)物質(zhì)濃度增加不會造成細菌死亡。圖中細菌密度減少是由稀釋率過高造成的。
答案:C
23.通過選擇培養(yǎng)基可以從混雜的微生物群體中分離出所需的微生物。在缺乏氮源的培養(yǎng)基上大部分微生物無法生長;在培養(yǎng)基中加入青霉素可以抑制細菌和放線菌的生長;在培養(yǎng)基中加入質(zhì)量分數(shù)為10%的酚可以抑制細菌和霉菌的生長。利用上述方法不能從混雜的微生物群體中分別分離出( )。
A.固氮菌B.霉菌
C.放線菌D.大腸桿菌
解析:固氮微生物的生長不需要從培養(yǎng)基上獲得氮源,可在缺乏氮源的培養(yǎng)基上正常生長;加入青霉素的培養(yǎng)基上不能生長細菌和放線菌,則可分離出霉菌和酵母菌;加入酚的培養(yǎng)基使細菌和霉菌不能正常生長,而不影響放線菌的生長。
答案:D
24.美國研究人員通過對大腸桿菌進行基因改造,可以使它將植物纖維逐漸轉(zhuǎn)化為生物燃料。這種細菌不僅能以傳統(tǒng)生物能源技術(shù)中使用的蔗糖為原料,還能將廣泛存在于植物纖維中的半纖維素分解合成為燃料物質(zhì)。若要將這種大腸桿菌分離出來,應(yīng)將它們接種在( )。
A.不含氮源的培養(yǎng)基上
B.含有蛋白胨的固體培養(yǎng)基上
C.只含半纖維素而無其他碳源的選擇培養(yǎng)基上
D.不含營養(yǎng)要素的培養(yǎng)基上
解析:微生物生長繁殖所需的營養(yǎng)物質(zhì)分為碳源、氮源、水和無機鹽。要將能分解半纖維素的大腸桿菌分離出來應(yīng)選用選擇培養(yǎng)基。因此可以添加基因改造后大腸桿菌能利用而其他大腸桿菌不能利用的碳源來達到分離選擇所需細菌的目的。
答案:C
25.下列對四種微生物的相關(guān)敘述,錯誤的是( )。
A.CO2和NH3分別是硝化細菌的碳源和氮源,該生物所需的能源來自NH3的氧化
B.CO2和硝酸鹽分別是褐藻的碳源和氮源,該生物所需的能源來自太陽能
C.糖類和N2是乳酸菌的碳源和氮源,該生物所需的能源來自乳酸的氧化分解
D.葡萄糖既是酵母菌的碳源也是其能源,但CO2一定不是酵母菌的碳源
解析:乳酸菌不能固氮,因此N2不是其氮源,乳酸是乳酸菌的代謝產(chǎn)物。
答案:C
二、非選擇題(共5小題,共50分)
26.(14分)炭疽病是由炭疽桿菌引起的一種人畜共患傳染病,炭疽桿菌兩端截平、呈竹節(jié)狀排列,菌落呈卷發(fā)狀,對炭疽病疑似患者,可根據(jù)噬菌體的宿主專一性,通過實驗確診。
(1)細菌培養(yǎng):采集疑似患者的樣本,分離培養(yǎng),獲得可疑菌落。
(2)細菌鑒定:實驗流程如下圖所示。
①對配制的液體培養(yǎng)基等需采取 滅菌;實驗所用液體培養(yǎng)基的碳源為 (填“無機碳”或“有機碳”)。
②挑選可疑菌落制片后,用 觀察,可看到呈竹節(jié)狀排列的桿菌。
③接種可疑菌后,35 ℃培養(yǎng)24小時,液體培養(yǎng)基變渾濁,原因是 ,對照組試管中應(yīng)加入 ,與實驗組同時培養(yǎng)6小時后,若實驗組液體培養(yǎng)基的渾濁度比對照組 (填“高”或“低”),則可明確疑似患者被炭疽桿菌感染;反之則排除。
④對排除的疑似患者及易感人群,可接種炭疽桿菌疫苗,刺激機體產(chǎn)生相應(yīng)抗體。與產(chǎn)生抗體相關(guān)的細胞除T細胞、B細胞外,還有 。
解析:對微生物的培養(yǎng)基一般采用高壓蒸汽滅菌,以維持各成分比例及pH的穩(wěn)定性。液體培養(yǎng)基的渾濁度與微生物的密度呈正相關(guān),由培養(yǎng)基的渾濁度可推斷微生物的密度。
答案:(每空2分)(2)①高壓蒸汽 有機碳 ②顯微鏡
③細菌大量繁殖 等量生理鹽水 低 ④吞噬細胞、漿細胞
27.(10分)發(fā)酵法生產(chǎn)酒精后的廢液(pH=4.3)含有大量有機物,可用于培養(yǎng)、獲得白地霉菌體,生產(chǎn)高蛋白飼料。培養(yǎng)、制取白地霉菌體的實驗過程示意圖如下:
請據(jù)圖分析回答問題。
(1)實驗過程中培養(yǎng)白地霉的培養(yǎng)基是 。培養(yǎng)基定量分裝前,先調(diào)節(jié) ,分裝后用棉塞封瓶口,最后 處理。
(2)圖中①過程稱為 ,從甲到丁的培養(yǎng)過程是為了 。白地霉的代謝類型為 。
(3)為確定菌體產(chǎn)量,圖中②操作之前,應(yīng)先稱量 的質(zhì)量。過濾后需反復(fù)烘干稱量,直至 。所得菌體干重等于
。
解析:從題干可知,該實驗是用發(fā)酵法產(chǎn)生酒精后的廢液來培養(yǎng)白地霉,再分析題中的流程圖可知廢液上清液就是白地霉的培養(yǎng)液。制備培養(yǎng)液的幾個要點:營養(yǎng)要均衡,pH要適宜,無菌。所以在分裝前首先要調(diào)節(jié)pH,然后進行滅菌,殺死所有的微生物,冷卻后接種。接種完成后要進行擴大培養(yǎng)以便獲得更多的微生物菌體。用發(fā)酵法產(chǎn)生酒精后的廢液含有大量的有機物,并且培養(yǎng)菌體的錐形瓶是開放的,可推知白地霉的代謝類型是異養(yǎng)需氧型。經(jīng)過一段時間的培養(yǎng)要獲得菌體的干重,可采用差值法,即先稱濾紙的質(zhì)量,再用濾紙過濾培養(yǎng)液,將得到的過濾物連同濾紙一起進行烘干,直至烘干物的質(zhì)量不發(fā)生變化,此時的質(zhì)量減去濾紙的質(zhì)量即獲得所培養(yǎng)微生物菌體的干重。
答案:(每空2分)(1)廢液上清液 pH 滅菌
(2)接種 擴大培養(yǎng) 異養(yǎng)需氧型
(3)濾紙 恒重(質(zhì)量基本不變) 恒重時的質(zhì)量與濾紙質(zhì)量之差(答案合理即可)
28.(8分)某種一次性餐具不是傳統(tǒng)塑料,而是用生物材料“玉米塑料”制成的,這種材料對環(huán)境沒有任何污染。“玉米塑料”是上海同濟大學(xué)任杰教授研制的可以代替?zhèn)鹘y(tǒng)塑料的化工塑料?!坝衩姿芰稀钡某煞质且环N高分子材料聚乳酸,其生產(chǎn)流程大致如下圖。請根據(jù)生產(chǎn)流程圖回答下列問題。
(1)玉米漿發(fā)酵工程需要在 環(huán)境條件下進行。
(2)研究人員為了提高生產(chǎn)效率,需要獲得純正的乳酸菌。從土壤中提純分離乳酸菌所用的培養(yǎng)基從功能上看屬于 培養(yǎng)基。接種乳酸菌最常用的是平板劃線法和 法。
(3)培養(yǎng)基配方中除了提供水、碳源、氮源和無機鹽外,還要滿足微生物對 、 以及氧氣的要求。
(4)為了判斷培養(yǎng)基的制作是否合格,需要將接種乳酸菌的甲培養(yǎng)基和一個 的乙培養(yǎng)基都放在恒溫箱中培養(yǎng),分別觀察并記錄結(jié)果。
解析:(1)發(fā)酵過程中利用乳酸菌產(chǎn)生乳酸,故在無氧環(huán)境中進行。
(2)獲得特定菌的培養(yǎng)基是選擇培養(yǎng)基,接種方法除平板劃線法之外,還常用稀釋涂布平板法。
(3)微生物的培養(yǎng)基中有水、無機鹽、碳源和氮源,另外還需要生長因子,還要滿足微生物對pH、特殊營養(yǎng)物質(zhì)以及氧氣的要求。
(4)培養(yǎng)基是不是污染需培養(yǎng)后看有無菌落生成,同時需要設(shè)置未接種微生物的培養(yǎng)基進行對照。
答案:(1)無氧
(2)選擇 稀釋涂布平板
(3)pH 特殊營養(yǎng)
(4)未接種
29.(10分)根據(jù)各類微生物的形態(tài)結(jié)構(gòu)特點和新陳代謝類型,利用選擇培養(yǎng)基和鑒別培養(yǎng)基,結(jié)合顯微鏡檢,以及菌落特征,可以把混雜在一起的大腸桿菌、硝化細菌、乳酸菌、酵母菌、金黃色葡萄球菌、圓褐固氮菌分離開來。下面是分離篩選的方法、步驟,請根據(jù)各個步驟的條件,填寫空格中的內(nèi)容。
首先配制一系列不同性質(zhì)的固體培養(yǎng)基,然后進行高溫滅菌。再將上述微生物的混合液分別接種到各種培養(yǎng)基上培養(yǎng)。
(1)用無氮培養(yǎng)基可篩選出 。
(2)用不含有機碳源的選擇培養(yǎng)基可篩選出 。
(3)酵母菌的篩選需要在常規(guī)培養(yǎng)基中另外加入
。
(4)用加了較高濃度NaCl的培養(yǎng)基可選擇出 ,或者根據(jù)菌落的顏色呈現(xiàn) 色,將其挑取單獨培養(yǎng)。
(5)利用伊紅和美藍培養(yǎng)基培養(yǎng)混合菌,菌落呈 色并帶有金屬光澤的是 ,挑取該菌落單獨培養(yǎng)。結(jié)合顯微鏡檢和進一步用伊紅和美藍培養(yǎng)基鑒別培養(yǎng)來確定。
(6)在無氧環(huán)境下培養(yǎng)混合菌,
可以生長,加入一定濃度的乳酸,使培養(yǎng)基pH充分降低,可抑制 的生長,利用菌落特征,結(jié)合顯微鏡檢,選取生長優(yōu)勢的菌落,即可分離出 。
解析:圓褐固氮菌為固氮微生物,可以利用空氣中的氮氣,因而可以在不含氮源的培養(yǎng)基上生存。硝化細菌為自養(yǎng)型微生物,可以在不含有機碳源的培養(yǎng)基上生長。在培養(yǎng)基上加入青霉素,可抑制細菌、放線菌生長,從而可分離出酵母菌和霉菌。高濃度的食鹽可抑制多種細菌的生長,但不影響金黃色葡萄球菌的生長。伊紅和美藍與大腸桿菌代謝產(chǎn)物結(jié)合,使菌落呈深紫色,并帶有金屬光澤。乳酸菌產(chǎn)生的乳酸可抑制其他微生物的生長,但對自己的生長影響不大。
答案:(每空1分)(1)圓褐固氮菌 (2)硝化細菌 (3)某種抗生素,如青霉素 (4)金黃色葡萄球菌 橘紅(金黃) (5)深紫 大腸桿菌 (6)大腸桿菌、乳酸菌、酵母菌 大腸桿菌和酵母菌 乳酸菌
30.(8分)臨床使用抗生素前,有時需要做細菌耐藥實驗。實驗時,首先要從病人身上獲取少量樣本,然后按照一定的實驗步驟操作,以確定某致病菌對不同抗生素的敏感性。
回答下列問題。
(1)為了從樣本中獲取致病菌單菌落,可用 法或 法將樣本接種于固體培養(yǎng)基表面,經(jīng)過選擇培養(yǎng)、鑒別等步驟獲得。
(2)取該單菌落適當(dāng)稀釋,用 法接種于固體培養(yǎng)基表面,在37 ℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24 h,使其均勻生長,布滿平板。
(3)為了檢測該致病菌對于抗生素的敏感性,將分別含有A、B、C、D四種抗生素的濾紙片均勻置于該平板上的不同位置,培養(yǎng)一段時間后,含A的濾紙片周圍出現(xiàn)透明圈,說明該致病菌對抗生素A ;含B的濾紙片周圍沒有出現(xiàn)透明圈,說明該致病菌對抗生素B ;含C的濾紙片周圍的透明圈比含A的小,說明 ;含D的濾紙片周圍的透明圈也比含A的小,且透明圈中出現(xiàn)了一個菌落,在排除雜菌污染的情況下,此菌落很可能是抗生素D的 。
(4)根據(jù)上述實驗結(jié)果,為達到抗菌目的,最好應(yīng)選用抗生素 。
解析:(1)為了獲得樣本中致病菌單菌落,可用稀釋涂布平板法或平板劃線法將樣本接種到固體培養(yǎng)基表面,再經(jīng)選擇、鑒別等步驟獲得。(2)欲讓菌落均勻生長,布滿平板,應(yīng)將單菌落稀釋后再用稀釋涂布平板法將菌種接到培養(yǎng)基表面。(3)在長滿菌落的平板上,含抗生素A的濾紙片周圍出現(xiàn)透明圈,說明該致病菌對抗生素A敏感;含B的濾紙片周圍沒有出現(xiàn)透明圈,說明該致病菌對抗生素B不敏感;含C的濾紙片周圍的透明圈比含A的小,說明該致病菌對抗生素C的敏感性弱于對抗生素A的敏感性。含D濾紙片周圍的透明圈也比含A的小,且透明圈中出現(xiàn)了一個菌落,如不考慮其他雜菌污染的情況,此菌落很可能是抗生素D的耐藥菌。(4)根據(jù)以上結(jié)果,選用抗生素A效果最好。
答案:(1)平板劃線 稀釋涂布平板
(2)稀釋涂布平板
(3)敏感 不敏感 該致病菌對C的敏感性比對A的弱 耐藥菌
(4)A
培養(yǎng)皿
培養(yǎng)基成分
菌落數(shù)
Ⅰ
瓊脂、葡萄糖
35
Ⅱ
瓊脂、葡萄糖、生長因子
250
Ⅲ
瓊脂、生長因子
0
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